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plasma清洗是怎么活化聚丙烯微孔膜?
基因芯片也被称为寡核苷酸微阵列,它利用固定固相合成技术或探针固定技术将一系列不同序列的寡核苷酸固定在固相载体上。目前,DNA微阵列原位合成的载体主要是玻璃片和硅片,而聚丙烯膜、尼龙膜等聚合物微孔膜主要用于点样生物芯片的制备。这种薄膜作为芯片载体具有较强的荧光背景,过去必须使用同位素检测,因此不受人们的青睐。
plasma清洗引起接枝是近年来出现的一种新型装饰方法。它可以在短时间内(几秒到几分钟)通过辉光放电形成等离子体,所需的功能基团可以直接连接到膜上。与传统方法相比,它具有简单的工艺和易于操作的功能基团。.基膜及接枝单体选择范围广等优点。在氢气、氮气混合气氛中,选用微孔聚丙烯膜作为DNA芯片原位合成的载体,对膜进行等离子体处理,通过真空完全反射红外光谱,X辐射光电子能谱表征,确认大量氨基直接连接到微孔聚丙烯膜上。
plasma清洗接枝氨基效果的主要因素有处理时间和放电功率。如果膜片上一分子氨基与一分子的寡核苷酸发生偶联反应,随后所进行的脱DMT反应就有一分子的DMT被脱除下来,而DMT的稀溶液在酸性介质中符合郎伯-比尔定律,且在498nm左右有很大吸收峰。等离子体处理后表面变粗、孔径变大而清晰,这是由于等离子体中的离子、激发态分子和自由基等各种能量的粒子与材料表面进行多种相互作用,即利用H2和N2的等离子体进行表面反应,参与反应的有激发态分子、自由基和离子,也包括等离子体辐射紫外光的作用,通过表面反应在表面引入了氨基,并产生表面侵蚀,形成交联结构层或表面自由基。
这些结果进一步表明氨基已经连接到薄膜表面。至于引入酰胺基团,可能是plasma清洗后薄膜表面产生活性自由基,进一步与空气中的氧气作用结果。也可以知道,直接轰击面吸收峰带明显强于另一侧,表明其上接枝氨基数量较多。含氮基团氨基和酰胺基都是在等离子体处理过程中引入的。等离子体可在微孔聚丙烯膜上引发接枝氨基,用该方法改性的基材可直接进行DNA原位合成。从DMT溶液的紫外吸光值和偶联效率来看,明显高于目前用氨基装饰的玻璃片基,说明其合成的DNA探针密度远高于功能玻璃。此外,它易于加工,预计将成为DNA原位合成的一种新型基材。
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